Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MBNL1 Double Nickase Plasmid (h): sc-402194-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das MBNL1 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- MBNL1 Double-Nickase-Plasmid (h) und MBNL1 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf MBNL1 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: MBNL1: sc-47740
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
MBNL1 Double Nickase Plasmid (h) | sc-402194-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MBNL1 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-402194-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MBNL1 (Muscleblind-like Splicing Regulator 1) kodiert ein RNA-bindendes Protein, das YGCY-Motive in Prä-mRNAs erkennt, um alternatives Spleißen, mRNA-Lokalisierung und -Stabilität zu steuern. Es koordiniert posttranskriptionale Genregulationsprogramme, die für die Myogenese, die neuronale Differenzierung und die Aufrechterhaltung gewebespezifischer Isoform-Expression wichtig sind. MBNL1 ist an RNA-Prozessierung sowie an Spleißosom-assoziierten Signalwegen beteiligt und hilft, entwicklungsabhängige Spleiß-Übergänge über viele Transkripte hinweg zu etablieren. Eine Fehlregulation oder funktionelle Sequestrierung von MBNL1 steht in engem Zusammenhang mit aberranten Spleißsignaturen, wie sie bei der myotonen Dystrophie und anderen neuromuskulären Phänotypen beobachtet werden, und macht MBNL1 zu einem zentralen Ansatzpunkt für mechanistische Studien zur fehlerhaften RNA-Verarbeitung.
MBNL1 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des MBNL1-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von MBNL1 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die MBNL1-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit MBNL1-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.