matrin-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-418085
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- matrin-3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico matrin-3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:matrin-3 Anticorpo (2539C3a): sc-81318
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
matrin-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-418085 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
MATR3 codifica a matrin-3, uma proteína de ligação a RNA/DNA da matriz nuclear que se associa à lâmina nuclear e à cromatina para dar suporte à arquitetura nuclear e à organização do genoma. A matrin-3 participa do processamento de RNA, incluindo o splicing de pré-mRNA, a estabilização de mRNA e a regulação da expressão gênica por meio de interações com complexos ribonucleoproteicos. Suas funções se cruzam com vias que governam a organização nucleocitoplasmática, as respostas a danos no DNA e a dinâmica de grânulos de estresse, conectando o MATR3 à proteostase e à homeostase de RNA em neurônios. A desregulação ou mutações em MATR3 têm sido associadas a fenótipos neurodegenerativos, incluindo distúrbios do espectro ELA/DFT, tornando-o relevante para estudos de disfunção de proteínas ligantes de RNA e defeitos estruturais nucleares.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO matrin-3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MATR3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MATR3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MATR3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína matrin-3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MATR3 para a investigação da sinalização de matrin-3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MATR3 críticos para a função matrin-3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MATR3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo matrin-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo matrin-3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MATR3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo matrin-3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR matrin-3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MATR3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MATR3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.