Matrilin-1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406830

Descripción general

MATN1 codifica la matrilina-1, una proteína adaptadora de la matriz extracelular enriquecida en cartílago que ayuda a organizar la matriz pericelular al enlazar colágenos y proteoglicanos en redes supramoleculares. La matrilina-1 contribuye a la diferenciación de los condrocitos, a la integridad estructural del cartílago y al ensamblaje de la matriz extracelular durante la esqueletogénesis y la osificación endocondral. Gracias a sus dominios modulares y a su capacidad de multimerización, participa en procesos de remodelación de la matriz que influyen en la biomecánica del tejido y en la señalización célula–matriz. Las alteraciones en la expresión de MATN1 o en la organización de la matriz se estudian en el contexto de la degeneración del cartílago y de trastornos esqueléticos y articulares hereditarios o adquiridos en los que se altera la homeostasis de la matriz extracelular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Matrilin-1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen MATN1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del MATN1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de MATN1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Matrilin-1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en MATN1 para la investigación de la señalización de Matrilin-1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de MATN1 críticos para la función de Matrilin-1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de MATN1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Matrilin-1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Matrilin-1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus MATN1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Matrilin-1 (h) y el plásmido HDR Matrilin-1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología MATN1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana MATN1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.