Plásmido Doble Nickase (h) MAS1: sc-401674-NIC

MAS1 codifica el protooncogén Mas1, un receptor acoplado a proteína G de siete dominios transmembrana que actúa como un efector clave del brazo protector del sistema renina–angiotensina mediante la unión de angiotensina-(1–7). La señalización de MAS1 involucra las vías del óxido nítrico y de las prostaglandinas, modula las cascadas MAPK y PI3K/AKT de manera dependiente del contexto, e influye en el tono vascular, las respuestas inflamatorias y la remodelación tisular. En células humanas, la actividad de MAS1 se ha asociado con la regulación de la función endotelial, programas de señalización vinculados a la fibrosis y la homeostasis neurocardiovascular. La expresión desregulada de MAS1 o el desequilibrio de sus vías se ha investigado en la fisiopatología cardiovascular y renal, así como en fenotipos proliferativos e invasivos descritos en múltiples contextos tumorales.

MAS1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus MAS1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de MAS1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de MAS1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con MAS1 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.