Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
LYPLA3 Antibody (B-2): sc-376078. Western blot analysis of LYPLA3 expression in Caki-1 whole cell lysate (A) and human kidney tissue extract (B).
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LYPLA3 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-409535
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- LYPLA3 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在LYPLA3基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：LYPLA3: sc-376078，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
LYPLA3 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-409535 | 20 µg | $397.00 |
概述
PLA2G15 编码 LYPLA3，这是一种位于溶酶体的磷脂酶/去酰化酶，通过水解脂肪酰链参与磷脂周转以及膜脂的重塑。LYPLA3 通过促进溶酶体脂质分解代谢，与调控内体-溶酶体运输、自噬相关降解以及细胞脂质稳态的通路相交汇。溶酶体脂质处理失衡与代谢应激反应密切相关，并可影响炎症信号传导和细胞器功能，因此 LYPLA3 是研究人类细胞中脂质驱动扰动的一个有价值的切入点。对 LYPLA3 的功能性解析有助于开展脂质代谢及以溶酶体为中心的过程的机制研究，而这些过程常在疾病相关的细胞状态中发生改变。
LYPLA3 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中PLA2G15基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对PLA2G15基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏PLA2G15开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使LYPLA3蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建PLA2G15缺失的细胞模型，用于LYPLA3信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 LYPLA3 功能至关重要的 PLA2G15 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 PLA2G15 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 LYPLA3 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 LYPLA3 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 PLA2G15 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 LYPLA3 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 LYPLA3 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由PLA2G15同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定PLA2G15靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。