LXR alpha/NR1H3 Double Nickase Plasmid (m): sc-423616-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das LXR alpha/NR1H3 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- LXR alpha/NR1H3 Double-Nickase-Plasmid (m) und LXR alpha/NR1H3 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Nr1h3 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
LXR alpha/NR1H3 Double Nickase Plasmid (m) | sc-423616-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LXR alpha/NR1H3 Double Nickase Plasmid (m2) | sc-423616-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Nr1h3 kodiert den Liver-X-Rezeptor alpha (LXRα/NR1H3), einen ligandaktivierten nukleären Rezeptor, der mit RXR ein Heterodimer bildet, um Transkriptionsprogramme zu regulieren, die den Cholesterinexport, den Gallensäurestoffwechsel und die Fettsäuresynthese steuern. LXRα verknüpft die Wahrnehmung von Oxysterolen mit der Verarbeitung von Lipoproteinen, indem es Zielgene moduliert, die am reversen Cholesterintransport und an der Sterolhomöostase beteiligt sind, und greift in Makrophagen über Transrepressionsmechanismen in inflammatorische Signalwege ein. In Mausmodellen wird eine veränderte Nr1h3-Aktivität genutzt, um Dyslipidämie, atherosklerose-relevante Schaumzellbiologie, hepatische Steatose und metabolische Entzündung zu untersuchen. Diese Funktionen machen NR1H3 zu einem zentralen Knotenpunkt für die Erforschung immunmetabolischer Wechselwirkungen zwischen Leber, Fettgewebe und Kompartimenten der angeborenen Immunität.
LXR alpha/NR1H3 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Nr1h3-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Nr1h3 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Nr1h3-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Nr1h3-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.