LOC285636 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-415435-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LOC285636O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase LOC285636 (h) e o Plasmídeo Double Nickase LOC285636 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para C5orf51. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LOC285636 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-415435-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LOC285636 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-415435-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
C5orf51 codifica a proteína humana LOC285636, um produto gênico caracterizado de forma incompleta, com anotação funcional limitada nas bases de dados atuais de vias. Evidências genômicas e transcriptômicas disponíveis sugerem expressão dependente do contexto, o que sustenta a investigação de possíveis papéis em redes de regulação gênica, manutenção do estado celular e programas específicos de linhagem. Como loci de quadro aberto de leitura pouco caracterizados podem influenciar indiretamente o processamento de RNA, a regulação associada à cromatina ou a proteostase, estudos de perturbação são comumente usados para conectar a LOC285636 a processos celulares definidos. Traçar o perfil da interrupção de LOC285636 em sistemas-modelo relevantes pode ajudar a associar esse locus a assinaturas moleculares observadas em fenótipos relevantes para doenças, sem implicar desfechos clínicos.
LOC285636 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus C5orf51 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de C5orf51. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função C5orf51. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com C5orf51 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.