LMX1B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402945

Visão geral

LMX1B codifica um fator de transcrição do tipo homeobox LIM que regula a especificação do destino celular e o padrão de tecidos durante o desenvolvimento, com papéis de destaque na identidade dorsal dos membros, na diferenciação de podócitos e em programas de subtipos neuronais. Ele controla a expressão gênica ao coordenar interações mediadas por domínios LIM com co-reguladores transcricionais e a ligação ao DNA mediada pelo homeodomínio, influenciando a morfogênese, a organização da matriz extracelular e a arquitetura do citoesqueleto. Na biologia renal, o LMX1B sustenta a integridade da barreira de filtração glomerular ao modular redes gênicas de podócitos, conectando-se a vias que governam a estrutura do diafragma de fenda e a dinâmica da actina. Alterações genéticas em LMX1B estão associadas à síndrome unha–patela e a fenótipos renais e esqueléticos relacionados, tornando-o um alvo relevante para o estudo da regulação transcricional no desenvolvimento e na organogênese.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO LMX1B (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene LMX1B em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do LMX1B, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do LMX1B na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína LMX1B.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de LMX1B para a investigação da sinalização de LMX1B, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) LMX1B críticos para a função LMX1B
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos LMX1B para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo LMX1B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo LMX1B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus LMX1B. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo LMX1B Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR LMX1B (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia LMX1B para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo LMX1B definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.