LBX1 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406846

Übersicht

LBX1 (ladybird homeobox 1) kodiert einen Homeobox-Transkriptionsfaktor, der die embryonale Musterbildung und die Festlegung von Zelllinien reguliert, mit wichtigen Funktionen bei der Differenzierung von Interneuronen im Rückenmark sowie bei der Migration von Vorläuferzellen der Skelettmuskulatur. Durch sequenzspezifische DNA-Bindung hilft LBX1, Transkriptionsprogramme zu koordinieren, die die dorsoventrale Entwicklung des Neuralrohrs und myogene Signalwege während der Somitenbildung formen. Genetische Varianten und eine veränderte Regulation von LBX1 wurden mit Entwicklungsphänotypen in Verbindung gebracht, darunter eine erhöhte Anfälligkeit für die idiopathische Skoliose im Jugendalter, was seine Relevanz für die muskuloskelettale und neuroentwicklungsbezogene Forschung unterstreicht. In Zellmodellen wird LBX1 häufig hinsichtlich seines Einflusses auf den Differenzierungszustand, die Aufrechterhaltung der Zellidentität und nachgeschaltete transkriptionelle Netzwerke untersucht.

Das LBX1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des LBX1-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des LBX1-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von LBX1 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die LBX1-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von LBX1-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der LBX1-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf LBX1-Exone abzielen, die für die LBX1-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere LBX1-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom LBX1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom LBX1 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des LBX1-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das LBX1 HDR-Plasmid (h) und LBX1 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von LBX1-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten LBX1-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.