Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Plásmido Doble Nickase (h) L-type Ca++ CP α1C: sc-401062-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)L-type Ca++ CP α1C consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa L-type Ca++ CP α1C (h) y el plásmido de doble nickasa L-type Ca++ CP α1C (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a CACNA1C. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: L-type Ca++ CP α1C Anticuerpo (D-6): sc-398433
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) L-type Ca++ CP α1C | sc-401062-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) L-type Ca++ CP α1C | sc-401062-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CACNA1C codifica la subunidad α1C formadora del poro (CaV1.2) de los canales de Ca2+ dependientes de voltaje tipo L, que median la entrada de Ca2+ inducida por despolarización en células excitables y no excitables. La entrada de calcio impulsada por CaV1.2 acopla la actividad de la membrana con la señalización intracelular, incluida la acoplamiento excitación–contracción, la integración sináptica y la transcripción dependiente de calcio mediante vías como CaM/CaMK y calcineurina–NFAT. La actividad del canal influye en la electrofisiología del músculo cardíaco y liso, así como en la plasticidad neuronal, al modular la dinámica de los potenciales de acción y los programas posteriores de expresión génica. La variación genética o la desregulación de CACNA1C se asocia con fenotipos cardiovasculares y con riesgo de enfermedades neuropsiquiátricas, lo que lo convierte en un nodo ampliamente estudiado en las redes de señalización del calcio.
L-type Ca++ CP α1C El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus CACNA1C en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de CACNA1C. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de CACNA1C. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con CACNA1C alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.