KV1.5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404341

Visão geral

KCNA5 codifica a subunidade humana do canal de potássio dependente de voltagem KV1.5, um canal de K+ do tipo retificador tardio que conduz a corrente retificadora tardia ultrarrápida (IKur) e molda a repolarização e a excitabilidade da membrana. A atividade de KV1.5 influencia a duração do potencial de ação, as propriedades refratárias e a sinalização dependente de Ca2+ ao controlar o potencial de membrana em células eletricamente ativas, ligando-o a vias mais amplas de homeostase iônica e de remodelação eletrofisiológica. Alterações na expressão de KCNA5 ou na função do canal têm sido associadas a mudanças na eletrofisiologia atrial e a fenótipos relacionados a arritmias, e o gene também é estudado em contextos em que o fluxo de K+ modula proliferação e migração. Como resultado, KCNA5 é frequentemente investigado em mecanismos de remodelação atrial, canalopatias e redes de sinalização sensíveis à dinâmica do potencial de membrana.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO KV1.5 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene KCNA5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do KCNA5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do KCNA5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína KV1.5.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de KCNA5 para a investigação da sinalização de KV1.5, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) KCNA5 críticos para a função KV1.5
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos KCNA5 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo KV1.5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo KV1.5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus KCNA5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo KV1.5 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR KV1.5 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia KCNA5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo KCNA5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.