KLK7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403539

概要

KLK7はカリクレイン関連ペプチダーゼ7をコードしており、角層成分をプロセシングして落屑（desquamation）を調節することで表皮の恒常性に寄与する分泌型セリンプロテアーゼです。KLK7は細胞外のプロテオリシス・カスケードに関与し、皮膚微小環境においてタンパク質基質を制御された切断により処理することで、バリア機能、細胞間接着、炎症シグナル伝達に影響を及ぼし得ます。KLK7の発現または活性の破綻は皮膚の炎症やバリア障害と関連づけられており、周細胞性のプロテオリシスが浸潤関連の表現型に影響しうる上皮性悪性腫瘍の文脈でもしばしば研究されています。そのためKLK7は、プロテアーゼ活性と分化、サイトカインネットワーク、細胞外マトリックスのリモデリングを結びつける経路において一般的に解析対象となっています。

KLK7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるKLK7遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、KLK7内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、KLK7のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、KLK7タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、KLK7シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、KLK7欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• KLK7の機能に不可欠なKLK7エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、KLK7ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• KLK7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびKLK7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、KLK7遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  KLK7 HDRプラスミド（h）および KLK7 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはKLK7ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のKLK7標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。