Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (m) JAK2: sc-421200-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) JAK2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide JAK2 Double Nickase (m) et le plasmide JAK2 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Jak2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: JAK2 Antibody (C-10): sc-390539
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) JAK2 | sc-421200-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) JAK2 | sc-421200-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin Jak2 code la tyrosine kinase non réceptrice JAK2, médiateur central de la signalisation des récepteurs aux cytokines, qui couple la liaison du ligand à la phosphorylation des facteurs de transcription STAT. L’activité de JAK2 s’intègre aux voies JAK–STAT, MAPK/ERK et PI3K–AKT pour réguler l’hématopoïèse, la différenciation des cellules immunitaires, l’inflammation et l’homéostasie métabolique. Des études in vivo et cellulaires associent des perturbations de Jak2 à des réponses modifiées à l’érythropoïétine et à la thrombopoïétine, à la signalisation de stress et à un contrôle de la croissance dérégulé, ce qui le rend pertinent pour des modèles de myéloprolifération et de dysfonction immunitaire. En tant que nœud de signalisation, JAK2 est fréquemment utilisé pour disséquer les cascades de kinases proximales aux récepteurs et les programmes transcriptionnels en aval des cytokines.
JAK2 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Jak2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Jak2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Jak2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Jak2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.