Partículas Lentivirales de Activación (h) Jade-1: sc-410620-LAC

JADE1 codifica Jade-1, una proteína nuclear con dominio PHD (PHD finger) que actúa como regulador de la transcripción asociado a la cromatina al reconocer marcas de histonas y coordinar la acetilación de histonas mediante interacciones con complejos HAT como HBO1. Jade-1 participa en el control de la progresión del ciclo celular, las respuestas al daño del ADN y la diferenciación, al modular la accesibilidad de la cromatina y los programas de expresión génica. También se la ha vinculado con la regulación dependiente de ubiquitina de componentes de señalización, incluidas conexiones descritas con la modulación de la vía Wnt/β-catenina, lo que respalda funciones en el control del crecimiento y la homeostasis epitelial. La alteración de la expresión o la función de JADE1 se ha investigado en biología del cáncer y en fisiopatología relacionada con el riñón, por lo que es relevante para estudios de regulación epigenética y redes asociadas a supresores tumorales.

Las partículas de activación lentiviral Jade-1 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de JADE1 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral Jade-1 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción JADE1, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de Jade-1. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo JADE1 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.