IRGC1 Plasmide Double Nickase (h): sc-412702-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- IRGC1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il IRGC1 Double Nickase Plasmid (h) e il IRGC1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira IRGC. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
IRGC1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-412702-NIC | 20 µg | $410.00 |
IRGC (famiglia delle GTPasi correlate all’immunità, membro C) codifica IRGC1, una piccola GTPasi inducibile dall’interferone coinvolta nei programmi di difesa intrinseci della cellula e nel rimodellamento dinamico delle membrane intracellulari. Come parte della più ampia rete di GTPasi IRG/GBP, si ritiene che IRGC1 interagisca con la segnalazione dell’immunità innata, il traffico vescicolare e processi legati all’autofagia che influenzano la restrizione dei patogeni e l’omeostasi infiammatoria. Un’alterata regolazione delle GTPasi stimolate dall’interferone è stata associata a una segnalazione citochinica disfunzionale e a patologie tissutali immunomediate, rendendo IRGC un locus utile per studi meccanicistici delle vie di risposta all’interferone. IRGC1 umano è quindi di interesse per analizzare le fasi dipendenti da GTPasi nella difesa dell’ospite e nelle risposte allo stress cellulare.
IRGC1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus IRGC nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di IRGC. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di IRGC. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con IRGC interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.