Plásmido Doble Nickase (h) IRAK-1: sc-400264-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)IRAK-1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa IRAK-1 (h) y el plásmido de doble nickasa IRAK-1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a IRAK1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: IRAK-1 Anticuerpo (F-4): sc-5288
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) IRAK-1 | sc-400264-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) IRAK-1 | sc-400264-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IRAK1 codifica la quinasa 1 asociada al receptor de interleucina 1 (IRAK-1), una quinasa de serina/treonina que transduce señales desde los receptores tipo Toll y el complejo del receptor de IL-1 hacia las vías downstream de NF-κB y MAPK. Tras la unión del receptor, IRAK-1 participa en la señalización dependiente de MyD88, promoviendo la activación de TRAF6 y la inducción de programas génicos inflamatorios. Su actividad influye en las respuestas inmunitarias innatas, la producción de citocinas y la comunicación cruzada con la señalización relacionada con interferones. La desregulación de la señalización de IRAK-1 se ha implicado en estados inflamatorios aberrantes y en la patobiología relacionada con el sistema inmunitario, lo que respalda su uso como nodo mecanístico para el análisis de vías en modelos celulares humanos.
IRAK-1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus IRAK1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de IRAK1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de IRAK1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con IRAK1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.