Integrin αIIb/ITGA2B/CD41 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421160

概要

Itga2b はインテグリンαIIb（CD41）をコードしており、インテグリンβ3（CD61）とヘテロ二量体を形成して、血小板のフィブリノゲン受容体であるαIIbβ3となります。αIIbβ3は、血小板の接着および凝集を担う中心的なメディエーターです。活性化に伴い、αIIbβ3はインサイドアウト／アウトサイドインのシグナル伝達を起こし、フィブリノゲンやフォン・ヴィレブランド因子などの細胞外マトリックスリガンドを、細胞骨格リモデリング、フォーカルアドヒージョンの動態、ならびにSrc/FAK依存性のシグナル伝達経路へと結び付けます。マウスでは、Itga2b の発現は巨核球系譜へのコミットメントの指標となり、血小板産生および止血応答を支えます。インテグリンシグナルの異常や血小板活性化の変調は、血小板減少症、出血表現型、炎症に関連した血栓形成、ならびに血管疾患モデルにおける血小板—免疫クロストークの研究に広く関連します。

Integrin αIIb/ITGA2B/CD41 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるItga2b遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Itga2b内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Itga2bのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Integrin αIIb/ITGA2B/CD41タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Integrin αIIb/ITGA2B/CD41シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Itga2b欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Integrin αIIb/ITGA2B/CD41の機能に不可欠なItga2bエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Itga2bゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Integrin αIIb/ITGA2B/CD41 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびIntegrin αIIb/ITGA2B/CD41 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Itga2b遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Integrin αIIb/ITGA2B/CD41 HDRプラスミド（m）および Integrin αIIb/ITGA2B/CD41 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはItga2bホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のItga2b標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。