Integrin α4/ITGA4/CD49d CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401336

概要

ITGA4はインテグリンα4（CD49d）をコードしており、β1（VLA-4）またはβ7とヘテロ二量体を形成する接着受容体である。VCAM-1やフィブロネクチンなどのリガンドと結合し、細胞—細胞および細胞—細胞外マトリックス間の相互作用を仲介する。インテグリンのoutside-inシグナル伝達を介して、ITGA4は細胞骨格の再構築、フォーカルアドヒージョンの動態、さらに移動・生存・活性化状態を制御するFAK/Src、PI3K–AKT、MAPKなどの下流経路に影響を及ぼす。インテグリンα4は白血球のトラフィッキング、免疫シナプスの構築、組織ホーミングの主要な制御因子であり、炎症回路や腫瘍—間質相互作用との関連が示されている。ITGA4の活性または発現の異常は、慢性炎症、免疫細胞浸潤、ならびに支持的ニッチ内での血液悪性腫瘍細胞の接着といった文脈でしばしば研究対象となる。

Integrin α4/ITGA4/CD49d CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるITGA4遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ITGA4内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ITGA4のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Integrin α4/ITGA4/CD49dタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Integrin α4/ITGA4/CD49dシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ITGA4欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Integrin α4/ITGA4/CD49dの機能に不可欠なITGA4エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ITGA4ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Integrin α4/ITGA4/CD49d CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびIntegrin α4/ITGA4/CD49d CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ITGA4遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Integrin α4/ITGA4/CD49d HDRプラスミド（h）および Integrin α4/ITGA4/CD49d HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはITGA4ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のITGA4標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。