Particules Lentivirales d'Activation (m) Integrin α3/ITGA3/CD49c: sc-421161-LAC

Itga3 code l’intégrine α3 (ITGA3/CD49c), une sous-unité α qui s’associe à β1 pour former le récepteur de la laminine α3β1, coordonnant l’adhérence cellule–matrice extracellulaire et la signalisation bidirectionnelle. Via des programmes d’adhésions focales et de remodelage du cytosquelette, ITGA3 influence la migration cellulaire, la polarité et l’organisation de la membrane basale, en intégrant des signaux convergeant vers l’activité des voies FAK/Src, PI3K–AKT et MAPK. Dans les tissus de souris, l’intégrine α3 est largement impliquée dans la dynamique des épithéliums et de l’endothélium, notamment lors du remodelage associé aux plaies et au développement des organes, et une signalisation ITGA3 altérée est fréquemment étudiée dans des contextes d’inflammation, de fibrose tissulaire et de biologie de l’invasion tumorale.

Les particules d'activation lentivirales Integrin α3/ITGA3/CD49c (m) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de Itga3 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales Integrin α3/ITGA3/CD49c (m) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription Itga3, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de Integrin α3/ITGA3/CD49c. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif Itga3 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.