ING2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404193

Visão geral

ING2 (membro 2 da família “inhibitor of growth”) é uma proteína nuclear associada à supressão tumoral que atua como leitora de cromatina por meio do seu domínio PHD (plant homeodomain) C-terminal, reconhecendo H3K4me3 e coordenando programas transcricionais ligados à sinalização de dano ao DNA e ao controle do ciclo celular. Participa da regulação epigenética ao interagir com complexos de acetiltransferases/desacetilases de histonas e ao modular respostas ao estresse dependentes de p53, influenciando assim apoptose, senescência e estabilidade genômica. A ING2 tem sido relacionada a vias que controlam a acessibilidade da cromatina e o recrutamento de fatores de reparo após estresse genotóxico. Alterações na expressão ou na função de ING2 foram relatadas em múltiplos contextos de câncer e são estudadas por sua contribuição para a transformação oncogênica, o potencial metastático e mecanismos de resistência a terapias em nível molecular.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ING2 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ING2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ING2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ING2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ING2.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ING2 para a investigação da sinalização de ING2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ING2 críticos para a função ING2
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ING2 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo ING2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo ING2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ING2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo ING2 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR ING2 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ING2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ING2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.