ILKAP Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405879

Descripción general

ILKAP (fosfatasa de serina/treonina 2C asociada a la quinasa ligada a integrinas) codifica una fosfatasa de la familia PP2C que se asocia con complejos de señalización vinculados a integrinas y modula el control dependiente de la fosforilación de la adhesión celular y la organización del citoesqueleto. Al desfosforilar sustratos específicos dentro de vías asociadas a integrinas y a la matriz extracelular (MEC), ILKAP puede influir en la migración celular, la mecanotransducción y las salidas de señalización sensibles a factores de crecimiento. Se han estudiado la expresión o actividad alteradas de ILKAP en contextos que implican desregulación de la señalización de adhesión, respuestas al estrés y reprogramación de vías que sustentan fenotipos malignos. Como resultado, ILKAP se investiga con frecuencia en modelos de invasión tumoral, señalización de supervivencia y regulación de la proliferación dependiente de la adhesión.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO ILKAP (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ILKAP en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ILKAP junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ILKAP tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína ILKAP.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ILKAP para la investigación de la señalización de ILKAP, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de ILKAP críticos para la función de ILKAP
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ILKAP para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido ILKAP CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido ILKAP CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ILKAP. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR ILKAP (h) y el plásmido HDR ILKAP (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ILKAP para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ILKAP definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.