IL-4I1 Lentiviral Activation Particles (m): sc-420354-LAC

Mouse Il4i1 kodiert IL-4I1, eine sekretierte L-Aminosäure-Oxidase, die überwiegend von antigenpräsentierenden Zellen exprimiert wird und die Immunhomöostase über Aminosäurekatabolismus und Redox-Signalgebung moduliert. Durch die Oxidation von Substraten wie L-Phenylalanin erzeugt IL-4I1 Wasserstoffperoxid und verwandte Metabolite, die in entzündlichen Mikroumgebungen die Aktivierungsschwellen von T‑Zellen, Zytokinprogramme und die Funktion myeloider Zellen beeinflussen können. Die Il4i1-Aktivität überschneidet sich mit Signalwegen, die die antigengetriebene adaptive Immunität, Antworten auf oxidativen Stress und die metabolische Regulation von Effektor- gegenüber regulatorischen Immunzuständen steuern. Eine fehlregulierte IL-4I1-Expression wurde mit veränderter Immunsuppression und inflammatorischem Remodeling in Kontexten wie Infektionen, Autoimmunität und tumorassoziierter Immunflucht in Verbindung gebracht, was IL-4I1 als mechanistischen Knotenpunkt in der Immunmetabolismusforschung unterstützt.

IL-4I1 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Il4i1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

IL-4I1 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Il4i1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen IL-4I1-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Il4i1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.