IL-1Rrp2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406998

Panoramica

IL1RL2 codifica IL-1Rrp2, un membro della famiglia dei recettori dell’interleuchina-1 che partecipa alla segnalazione immunitaria innata e mucosale. In quanto recettore delle citochine IL-36, IL-1Rrp2 si associa alla proteina accessoria del recettore dell’IL-1 per attivare una segnalazione dipendente da MyD88, con conseguente attivazione delle vie NF-κB e MAPK che regolano l’espressione di geni infiammatori e le risposte della barriera epiteliale. IL1RL2 è espresso sia nei compartimenti immunitari sia in quelli epiteliali ed è comunemente studiato nel contesto dell’infiammazione guidata dalle citochine, inclusi i processi infiammatori cutanei e delle vie aeree. Una segnalazione IL-36–IL-1Rrp2 deregolata è stata associata a fenotipi infiammatori, rendendo questo bersaglio rilevante per studi meccanicistici delle reti citochiniche e dell’infiammazione tissutale.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO IL-1Rrp2 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene IL1RL2 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del IL1RL2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto IL1RL2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina IL-1Rrp2.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di IL1RL2 per lo studio della segnalazione di IL-1Rrp2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni IL1RL2 critici per la funzione di IL-1Rrp2
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di IL1RL2 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal IL-1Rrp2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal IL-1Rrp2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus IL1RL2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal IL-1Rrp2 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR IL-1Rrp2 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia IL1RL2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio IL1RL2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.