Plasmide Double Nickase (h) IL-12Rβ1: sc-404602-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) IL-12Rβ1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide IL-12Rβ1 Double Nickase (h) et le plasmide IL-12Rβ1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant IL12RB1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: IL-12Rβ1 Antibody (A-10): sc-166776
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) IL-12Rβ1 | sc-404602-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) IL-12Rβ1 | sc-404602-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IL12RB1 code la sous-unité bêta 1 du récepteur de l’interleukine‑12 (IL‑12Rβ1), un composant commun des récepteurs hétérodimériques de l’IL‑12 et de l’IL‑23, exprimés sur les lymphocytes T, les cellules NK et d’autres populations immunitaires. La liaison du ligand favorise l’activation des kinases JAK2/TYK2 et la signalisation STAT en aval, soutenant la polarisation Th1, la production d’IFN‑γ et la coordination de l’immunité à médiation cellulaire. Cet axe relie les réponses immunitaires innée et adaptative via des programmes transcriptionnels induits par les cytokines qui régulent la défense antimicrobienne et le remodelage inflammatoire. Des altérations génétiques ou de l’expression d’IL12RB1 sont associées à une dérégulation immunitaire et à une susceptibilité accrue aux infections, ce qui en fait un point d’entrée pertinent pour étudier la signalisation des cytokines et les interactions hôte–pathogène.
IL-12Rβ1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus IL12RB1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de IL12RB1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de IL12RB1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de IL12RB1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.