Plasmide Double Nickase (h) IGFBP7: sc-418272-NIC

IGFBP7 (insulin-like growth factor binding protein 7) est une glycoprotéine sécrétée qui module la signalisation de l’IGF/de l’insuline en régulant la disponibilité des ligands et l’engagement des récepteurs, influençant ainsi la croissance cellulaire, l’adhérence et les programmes associés à la sénescence. Elle contribue aux interactions avec la matrice extracellulaire et à une signalisation sensible au stress, en recoupant des voies qui façonnent la biologie endothéliale, le remodelage tissulaire et les microenvironnements inflammatoires. Des altérations de l’expression d’IGFBP7 ont été rapportées dans divers contextes de fibrose, de dysfonction vasculaire et de remodelage stromal associé au cancer, où elle peut affecter la prolifération et la dynamique cellule–matrice. Par conséquent, IGFBP7 est fréquemment étudiée comme un nœud reliant la signalisation des facteurs de croissance à la régulation extracellulaire et aux transitions d’état cellulaire.

IGFBP7 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus IGFBP7 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de IGFBP7. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de IGFBP7. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de IGFBP7.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.