IFN-α7 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421044

Descripción general

Ifna7 codifica el interferón alfa-7 (IFN-α7) de ratón, una citocina de interferón de tipo I producida principalmente en respuesta a señales de detección de virus y de ácidos nucleicos. El IFN-α7 se une al complejo receptor IFNAR para activar la fosforilación de STAT1/STAT2 dependiente de JAK1/TYK2, lo que favorece la formación del complejo transcripcional ISGF3 y la inducción de genes estimulados por interferón que moldean la inmunidad innata y adaptativa. Este eje de señalización se cruza con vías de receptores de reconocimiento de patrones, incluidos los receptores tipo Toll (TLR) y los receptores tipo RIG-I, influyendo en la presentación de antígenos, las redes de citocinas y los programas de restricción antiviral. La actividad desregulada del interferón de tipo I se ha implicado en fenotipos inflamatorios y autoinmunes, así como en interacciones tumor-inmunidad, lo que convierte a Ifna7 en un punto útil para estudios mecanísticos de la biología impulsada por interferón.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO IFN-α7 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Ifna7 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Ifna7 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Ifna7 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína IFN-α7.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Ifna7 para la investigación de la señalización de IFN-α7, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Ifna7 críticos para la función de IFN-α7
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Ifna7 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido IFN-α7 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido IFN-α7 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Ifna7. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR IFN-α7 (m) y el plásmido HDR IFN-α7 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Ifna7 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Ifna7 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.