Plasmide Double Nickase (h) IFI-35: sc-406072-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) IFI-35 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide IFI-35 Double Nickase (h) et le plasmide IFI-35 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant IFI35. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: IFI-35 Antibody (B-1): sc-393513
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) IFI-35 | sc-406072-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) IFI-35 | sc-406072-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IFI35 code IFI-35, une protéine à fermeture éclair à leucines inductible par l’interféron, qui forme des complexes fonctionnels avec NMI et contribue à des programmes d’expression génique pilotés par l’interféron de type I. IFI-35 est associée à la signalisation de l’immunité innée et aux réponses transcriptionnelles inflammatoires en aval des voies stimulées par l’interféron, influençant des processus régulés par les cytokines ainsi que les réponses au stress cellulaire. Une expression altérée de IFI35 a été rapportée dans des contextes d’infection virale, de maladies auto-immunes et inflammatoires, ainsi que dans des signatures immunitaires observées dans de nombreux cancers, ce qui en fait un nœud utile pour disséquer des phénotypes associés à l’interféron. L’étude d’IFI-35 appuie des travaux mécanistiques sur les interactions hôte–pathogène, les états d’activation immunitaire et les interactions entre voies de signalisation qui façonnent l’homéostasie cellulaire.
IFI-35 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus IFI35 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de IFI35. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de IFI35. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de IFI35.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.