Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
HSL Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401341-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HSLO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HSL (h) e o Plasmídeo Double Nickase HSL (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para LIPE. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HSL Anticorpo (G-7): sc-74489
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HSL Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401341-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HSL Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401341-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O LIPE humano codifica a lipase sensível a hormônios (HSL), uma hidrolase de serina que catalisa etapas-chave na mobilização de lipídios neutros ao hidrolisar diacilgliceróis e outros ésteres lipídicos em adipócitos e tecidos esteroidogênicos. A atividade da HSL é controlada dinamicamente por fosforilação ligada a PKA e AMPK e integra a sinalização adrenérgica e da insulina para regular a lipólise, a remodelação de gotículas lipídicas e o balanço energético celular. Por meio de seu papel no fluxo de ácidos graxos e em intermediários de sinalização lipídica, o LIPE influencia a organização de vias metabólicas, incluindo o metabolismo de glicerolipídios e a utilização subsequente de substratos mitocondriais. Alterações na função da HSL e na regulação de LIPE são estudadas no contexto de desregulação metabólica, inflamação do tecido adiposo e fenótipos associados à resistência à insulina.
HSL O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus LIPE em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de LIPE. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função LIPE. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com LIPE interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.