HS6ST2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407513

Descripción general

HS6ST2 codifica la heparán sulfato 6-O-sulfotransferasa 2, una enzima residente del aparato de Golgi que cataliza la 6-O-sulfatación de residuos de glucosamina durante la biosíntesis de proteoglicanos de heparán sulfato. Esta modificación define los patrones de sulfatación del heparán sulfato que regulan la unión de ligandos y las funciones de correceptor, influyendo en vías de señalización como FGF, VEGF, WNT, BMP y señales mediadas por quimiocinas. Al ajustar las interacciones de los glicosaminoglicanos de la matriz extracelular y la superficie celular, HS6ST2 contribuye a la adhesión celular, la migración y el patrón de desarrollo. La sulfatación alterada del heparán sulfato se ha asociado con una señalización desregulada de factores de crecimiento y con la remodelación del microambiente tumoral, lo que respalda la investigación de HS6ST2 en biología del cáncer y otros trastornos vinculados a la señalización dependiente de la matriz extracelular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO HS6ST2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen HS6ST2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del HS6ST2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de HS6ST2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína HS6ST2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en HS6ST2 para la investigación de la señalización de HS6ST2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de HS6ST2 críticos para la función de HS6ST2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de HS6ST2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido HS6ST2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido HS6ST2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus HS6ST2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR HS6ST2 (h) y el plásmido HDR HS6ST2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología HS6ST2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana HS6ST2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.