Plasmide Double Nickase (h) HoxD9: sc-404606-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) HoxD9 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide HoxD9 Double Nickase (h) et le plasmide HoxD9 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant HOXD9. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: HoxD9 Antibody (H-2): sc-137134
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) HoxD9 | sc-404606-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) HoxD9 | sc-404606-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HOXD9 code le facteur de transcription à homéoboîte HoxD9, un régulateur de la liaison à l’ADN dépendante de la séquence, qui contribue à établir le patron antéro-postérieur et l’identité positionnelle au cours du développement embryonnaire. En tant qu’élément des réseaux de régulation des gènes HOX, HoxD9 module des programmes transcriptionnels qui contrôlent la différenciation, la morphogenèse et les décisions de destinée cellulaire, en s’intégrant au contrôle médié par la chromatine et aux voies de signalisation du développement. Une expression dérégulée de HOXD9 et une altération de l’activité des programmes HOX ont été associées à des modifications de la spécification de lignée et des programmes de prolifération observées dans de multiples contextes cancéreux ainsi que dans d’autres troubles du développement. Ces caractéristiques font de HOXD9 une cible utile pour étudier l’architecture des circuits transcriptionnels, la logique enhancer–promoteur et les mécanismes de més-expression de gènes du développement dans les cellules humaines.
HoxD9 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HOXD9 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HOXD9. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HOXD9. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HOXD9.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.