HMX2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m): sc-420886

Übersicht

Hmx2 kodiert den Homeobox-Transkriptionsfaktor HMX2, ein nukleäres DNA-bindendes Protein, das während der embryonalen Entwicklung Genexpressionsprogramme reguliert. Bei der Maus ist HMX2 an der Musterbildung und Differenzierung sensorischer Strukturen beteiligt, mit wichtigen Funktionen in der Morphogenese des Innenohrs und der Bildung des vestibulären Systems durch transkriptionelle Kontrolle der Linienfestlegung. Durch die Koordination entwicklungsbiologischer Transkriptionsnetzwerke beeinflusst HMX2 Zellschicksalsentscheidungen, die Gewebearchitektur und die Reifung spezialisierter Epithelien. Eine Störung Hmx2-assoziierter Signalwege ist relevant für die Erforschung angeborener Defekte, die Hör- und Gleichgewichtsfunktionen betreffen, sowie für ein besseres Verständnis allgemeiner Mechanismen entwicklungsbedingter Fehlregulation.

Das HMX2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des Hmx2-Gens in mouse-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des Hmx2-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von Hmx2 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die HMX2-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von Hmx2-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der HMX2-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf Hmx2-Exone abzielen, die für die HMX2-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere Hmx2-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom HMX2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m) und vom HMX2 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (m2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des Hmx2-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das HMX2 HDR-Plasmid (m) und HMX2 HDR-Plasmid (m2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von Hmx2-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten Hmx2-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.