Particules Lentivirales d'Activation (m) Histone Deacetylase 6 (HDAC6): sc-420820-LAC

Hdac6 code pour l’histone désacétylase 6 (HDAC6), une désacétylase majoritairement cytoplasmique qui régule l’acétylation de substrats non histoniques, notamment l’α-tubuline, HSP90 et la cortactine, influençant ainsi la dynamique des microtubules, l’activité des chaperonnes et le remodelage de l’actine. Par ces fonctions, HDAC6 coordonne des processus clés tels que l’autophagie et l’élimination des protéines mal repliées via les aggrésomes, le trafic intracellulaire et la signalisation de réponse au stress. L’activité de HDAC6 s’articule avec les voies de protéostasie impliquant le contrôle qualité dépendant de l’ubiquitine et peut moduler la signalisation inflammatoire ainsi que les programmes de motilité cellulaire. Des réseaux associés à HDAC6 dérégulés ont été impliqués dans des modèles de neurodégénérescence, des phénotypes liés au cancer et des pathologies d’origine immunitaire, ce qui soutient sa large utilité dans les études mécanistiques.

Les particules d'activation lentivirales Histone Deacetylase 6 (HDAC6) (m) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de Hdac6 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales Histone Deacetylase 6 (HDAC6) (m) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription Hdac6, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de Histone Deacetylase 6 (HDAC6). L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif Hdac6 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.