Histone cluster 1 H1E CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-402775

Übersicht

HIST1H1E kodiert Histon-Cluster 1 H1E, eine replikationsabhängige Linker-Histon-H1-Variante, die an nukleosomale DNA bindet, um höherstufige Chromatinstrukturen zu stabilisieren und die Genomkompaktierung zu beeinflussen. Durch die Modulation der Chromatinzugänglichkeit trägt H1E zur Regulation von Transkriptionsprogrammen, des Timings der DNA-Replikation und von DNA-Schadensantworten bei – unter anderem über Effekte auf Chromatin-Remodelling und die Rekrutierung von Reparaturfaktoren. Veränderungen der Stöchiometrie der H1-Familie und der Linker-Histon-Dynamik wurden mit epigenetischer Fehlregulation in Krebs- und neuroentwicklungsbezogenen Erkrankungen in Verbindung gebracht; HIST1H1E-bedingte Störungen können Zellschicksalsentscheidungen und die genomische Stabilität beeinflussen. Als Teil des Histon-Cluster-1-Lokus ist HIST1H1E zudem relevant für Studien zur S‑Phasen-gekoppelten Histonexpression und zum Chromatinaufbau.

Das Histone cluster 1 H1E CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des HIST1H1E-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des HIST1H1E-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von HIST1H1E nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die Histone cluster 1 H1E-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von HIST1H1E-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der Histone cluster 1 H1E-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf HIST1H1E-Exone abzielen, die für die Histone cluster 1 H1E-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere HIST1H1E-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom Histone cluster 1 H1E CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom Histone cluster 1 H1E CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des HIST1H1E-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das Histone cluster 1 H1E HDR-Plasmid (h) und Histone cluster 1 H1E HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von HIST1H1E-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten HIST1H1E-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.