Histamine H4 Receptor Plasmide Double Nickase (h): sc-402430-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Histamine H4 Receptor Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Histamine H4 Receptor Double Nickase Plasmid (h) e il Histamine H4 Receptor Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira HRH4. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Histamine H4 Receptor Plasmide Double Nickase (h) | sc-402430-NIC | 20 µg | $410.00 |
HRH4 codifica il recettore H4 dell’istamina (H4R), un recettore accoppiato a proteine G di classe A prevalentemente associato a Gi/o, che modula la chemiotassi delle cellule immunitarie, il rilascio di citochine e il tono infiammatorio in risposta all’istamina. L’attivazione del recettore influenza segnali di secondi messaggeri, come la riduzione del cAMP, la mobilizzazione del calcio e l’attività a valle della via MAPK/ERK, plasmando i programmi di traffico e attivazione dei leucociti. L’espressione di HRH4 nelle linee ematopoietiche collega questo recettore alla regolazione dell’infiammazione allergica e di processi immuno-mediati più ampi, rendendolo rilevante per studi meccanicistici delle reti di segnalazione infiammatoria. Una segnalazione istamina–H4R deregolata è stata associata a fenotipi infiammatori e pruriginosi in contesti di ricerca preclinica e traslazionale, a supporto del suo impiego come nodo funzionale nell’analisi delle vie dell’immunologia.
Histamine H4 Receptor Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HRH4 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HRH4. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HRH4. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HRH4 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.