Histamine H2 Receptor Plasmide Double Nickase (h): sc-401935-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Histamine H2 Receptor Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Histamine H2 Receptor Double Nickase Plasmid (h) e il Histamine H2 Receptor Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira HRH2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Histamine H2 Receptor Plasmide Double Nickase (h) | sc-401935-NIC | 20 µg | $410.00 |
HRH2 codifica il recettore H2 dell’istamina, un recettore accoppiato a proteine G che si associa principalmente a Gs per stimolare l’adenilil ciclasi, aumentare il cAMP e attivare una segnalazione dipendente da PKA. In contesti epiteliali e immunitari, la segnalazione di HRH2 modula la secrezione, la fisiologia della barriera e il tono infiammatorio, integrandosi con reti di secondi messaggeri che influenzano l’espressione genica e il metabolismo cellulare. Nell’ambito della comunicazione mediata dall’istamina nei tessuti gastrointestinali e respiratori, HRH2 è spesso studiato in relazione all’omeostasi della mucosa e a microambienti infiammatori deregolati. Dinamiche alterate della segnalazione recettoriale sono inoltre rilevanti per la ricerca sul crosstalk neuro-immune e su vie di segnalazione associate ai tumori, in cui programmi dipendenti dal cAMP possono rimodellare il comportamento cellulare.
Histamine H2 Receptor Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HRH2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HRH2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HRH2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HRH2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.