HDGF Lentiviral Activation Particles (h2): sc-402859-LAC-2

Humanes HDGF (hepatoma-derived growth factor) kodiert ein heparinbindendes, nukleäres und sezerniertes Protein, das als mitogener und pro-survival Faktor wirken kann und an der Progression des Zellzyklus, der transkriptionellen Regulation sowie chromatinassoziierten Prozessen beteiligt ist. HDGF ist mit Signalnetzwerken verknüpft, die Proliferation, Migration und angiogene Programme unterstützen, und trägt über kontextabhängige autokrine/parakrine Aktivität zu Stressantworten und Gewebeumbau bei. Eine dysregulierte HDGF-Expression wurde bei zahlreichen Krebserkrankungen sowie bei fibrotischen und vaskulären Pathologien beschrieben, wobei sie häufig mit aggressiven zellulären Phänotypen und veränderten Interaktionen mit dem Tumormikromilieu assoziiert ist. Die genetische Perturbation von HDGF ermöglicht mechanistische Untersuchungen der Wachstumsfaktor-Biologie, von nukleären Translokationsmotiven (z. B. PWWP-Domänen-vermittelte Chromatinbindung) und die Kartierung nachgeschalteter Signalwege in Modellen der Onkogenese, Entzündung und Fibrose.

HDGF Lentivirale Aktivierungspartikel (h2) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente HDGF-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

HDGF Lentivirale Aktivierungspartikel (h2) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der HDGF-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen HDGF-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen HDGF-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.