Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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HB9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420869
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HB9 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico HB9, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HB9 Anticorpo (F-5): sc-515769
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HB9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420869 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Mnx1 (HB9) codifica um fator de transcrição homeobox essencial para o desenvolvimento da região ventral da medula espinhal e para a especificação e a maturação de neurônios motores somáticos. O HB9 participa de programas transcricionais que coordenam a identidade de subtipos neuronais, a orientação axonal e a conectividade neuromuscular por meio da regulação da expressão gênica específica de linhagem. No pâncreas, o Mnx1 também contribui para decisões de linhagem endócrina, conectando-o a vias do desenvolvimento que moldam a organogênese e a determinação do destino celular. Alterações na expressão ou na função de MNX1 têm sido associadas a fenótipos do desenvolvimento de neurônios motores e vêm sendo estudadas no contexto de distúrbios congênitos do desenvolvimento neurológico e pancreático, bem como de desregulação de linhagem na biologia do câncer.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO HB9 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Mnx1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Mnx1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Mnx1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína HB9.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Mnx1 para a investigação da sinalização de HB9, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Mnx1 críticos para a função HB9
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Mnx1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo HB9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo HB9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Mnx1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo HB9 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR HB9 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Mnx1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Mnx1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.