HB9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402097

Visão geral

MNX1 codifica o fator de transcrição homeobox HB9, um regulador ligante de DNA essencial para o padrão embrionário e a especificação de linhagens, particularmente em neurônios motores em desenvolvimento da medula espinhal e em progenitores pancreáticos. O HB9 controla programas transcricionais que governam a diferenciação neuronal, a orientação axonal e a restrição do destino celular, coordenando redes a jusante de reguladores do desenvolvimento. A expressão desregulada de MNX1 ou a atividade aberrante de HB9 tem sido associada a estados de diferenciação alterados e a programas transcricionais oncogênicos em contextos de tumores hematológicos e sólidos. Como fator de transcrição do desenvolvimento, o MNX1 é frequentemente estudado para definir circuitos de regulação gênica, transições do estado da cromatina e efeitos dependentes do contexto sobre proliferação e diferenciação.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO HB9 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MNX1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MNX1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MNX1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína HB9.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MNX1 para a investigação da sinalização de HB9, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MNX1 críticos para a função HB9
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MNX1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo HB9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo HB9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MNX1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo HB9 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR HB9 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MNX1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MNX1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.