Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
h-prune Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-412914-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- h-pruneO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase h-prune (h) e o Plasmídeo Double Nickase h-prune (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para PRUNE1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:h-prune Anticorpo (F-5): sc-393318
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
h-prune Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-412914-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
h-prune Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-412914-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
PRUNE1 codifica a h-prune, um membro da família de fosfodiesterases DHH implicado no metabolismo de nucleotídeos cíclicos e na atividade fosfodiesterase, com funções adicionais na regulação da motilidade celular e da dinâmica do citoesqueleto. A h-prune tem sido associada a redes de sinalização envolvendo a renovação de adesões focais e vias ligadas a pequenas GTPases que coordenam fenótipos de migração e invasão em sistemas modelo. A perturbação genética de PRUNE1 está associada a distúrbios do neurodesenvolvimento, em linha com funções no desenvolvimento neuronal e na homeostase celular. Em biologia do câncer, alterações na expressão de PRUNE1 têm sido estudadas no contexto da progressão metastática e da reprogramação de vias que sustentam programas proliferativos e migratórios.
h-prune O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus PRUNE1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de PRUNE1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função PRUNE1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com PRUNE1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.