GSTM2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404795-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GSTM2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GSTM2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase GSTM2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GSTM2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GSTM2 Anticorpo (E-9): sc-376486
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GSTM2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404795-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GSTM2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404795-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A glutationa S-transferase mu 2 (GSTM2) é uma enzima citosólica de desintoxicação de fase II que catalisa a conjugação de glutationa a xenobióticos eletrofílicos e a produtos endógenos da peroxidação lipídica, contribuindo para a homeostase redox e para a defesa celular contra o estresse oxidativo. Como parte da rede de metabolismo da glutationa, a GSTM2 participa da biotransformação de intermediários reativos e pode influenciar a suscetibilidade celular a lesão oxidativa e a sinalização associada à inflamação. Variações na expressão ou na atividade da GSTM2 têm sido associadas a diferenças interindividuais na sensibilidade a substâncias químicas e nas respostas ao estresse, e ela é frequentemente estudada em contextos em que espécies reativas de oxigênio e carga de eletrófilos moldam fenótipos relevantes para doenças. Em biologia tumoral e em pesquisas de toxicologia, a GSTM2 também é investigada por seu papel na modulação de respostas a exposições ambientais e em vias de metabolismo de fármacos, sem implicar desfechos clínicos.
GSTM2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GSTM2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GSTM2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GSTM2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GSTM2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.