Plasmide Double Nickase (h) GPR52: sc-411266-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) GPR52 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GPR52 Double Nickase (h) et le plasmide GPR52 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GPR52. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) GPR52 | sc-411266-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) GPR52 | sc-411266-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GPR52 code un récepteur orphelin couplé aux protéines G de classe A, qui signale principalement via Gs afin d’augmenter l’AMPc intracellulaire et d’activer des programmes transcriptionnels dépendants de PKA/CREB. Il est enrichi dans des régions cérébrales liées aux circuits des ganglions de la base, où il module l’excitabilité neuronale et la signalisation synaptique en aval des voies GPCR à seconds messagers. Par ses effets sur l’homéostasie de l’AMPc et l’activité des réseaux, GPR52 est fréquemment étudié en neurobiologie et pour les interactions (« cross-talk ») avec la signalisation dopaminergique. Des modifications de la dynamique de signalisation des GPCR impliquant GPR52 ont été examinées en lien avec des phénotypes neuropsychiatriques et associés à la neurodégénérescence dans des modèles expérimentaux.
GPR52 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GPR52 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GPR52. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GPR52. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GPR52.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.