GPR39 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-427882

Descripción general

Gpr39 codifica GPR39, un receptor acoplado a proteína G sensible al zinc, implicado en la regulación de cascadas de señalización intracelular que determinan la supervivencia celular, la secreción y el tono inflamatorio. En sistemas murinos, la actividad de GPR39 se ha relacionado con la modulación de vías dependientes de AMPc y de Ca2+ y de la señalización de quinasas aguas abajo, influyendo en la función de la barrera epitelial, la señalización neuronal y la homeostasis metabólica. La alteración de la señalización de GPR39 se ha estudiado en contextos como la disfunción metabólica, la inflamación gastrointestinal y fenotipos neuroconductuales, lo que lo convierte en un nodo útil para la exploración de rutas de señalización. Como receptor de membrana que integra señales extracelulares con salidas transcripcionales y metabólicas, GPR39 ofrece una diana manejable para diseccionar redes impulsadas por GPCR in vivo y en células cultivadas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO GPR39 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Gpr39 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Gpr39 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Gpr39 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína GPR39.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Gpr39 para la investigación de la señalización de GPR39, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Gpr39 críticos para la función de GPR39
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Gpr39 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido GPR39 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido GPR39 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Gpr39. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR GPR39 (m) y el plásmido HDR GPR39 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Gpr39 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Gpr39 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.