GPR126 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407085

Descripción general

ADGRG6 (GPR126) codifica un receptor acoplado a proteína G de adhesión que integra señales de la matriz extracelular y de las interacciones célula–célula para regular la señalización a través de proteínas G heterotriméricas, incluidas vías dependientes de cAMP/PKA. GPR126 es un regulador clave del desarrollo y la mielinización de las células de Schwann y contribuye a la maduración de los nervios periféricos, además de desempeñar funciones en la biología del cartílago, el crecimiento esquelético y el desarrollo vascular. A través de su gran dominio extracelular y de la autoproteólisis en el sitio de proteólisis de los GPCR, GPR126 influye en programas de señalización mecanosensibles y del desarrollo. Alteraciones genéticas y funcionales de ADGRG6 se han asociado con fenotipos del neurodesarrollo y musculoesqueléticos, lo que respalda su relevancia para estudiar la mielinización, la diferenciación celular y la morfogénesis tisular.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO GPR126 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen ADGRG6 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del ADGRG6 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de ADGRG6 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína GPR126.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en ADGRG6 para la investigación de la señalización de GPR126, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de ADGRG6 críticos para la función de GPR126
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de ADGRG6 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido GPR126 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido GPR126 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus ADGRG6. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR GPR126 (h) y el plásmido HDR GPR126 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología ADGRG6 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana ADGRG6 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.