GDF-10 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-406826

Übersicht

GDF10 kodiert den Wachstumsdifferenzierungsfaktor 10 (GDF-10), einen sezernierten Liganden der TGF-β-Superfamilie, der an der Regulation der zellulären Differenzierung, der Gewebemusterbildung und des Umbaus der extrazellulären Matrix beteiligt ist. GDF-10 signalisiert über Serin/Threonin-Kinase-Rezeptoren, aktiviert kanonische, SMAD-abhängige Transkriptionsprogramme und greift in die umfassendere Kreuzregulation der TGF-β/BMP-Signalwege ein, die Zellschicksalsentscheidungen und stromale Antworten mitprägt. Eine veränderte GDF10-Expression wurde in der Literatur mit fehlregulierten Entwicklungsprozessen und aberranten Remodelling-Programmen in Verbindung gebracht, die für fibrotische und tumorassoziierte Mikroumgebungen relevant sind. In vitro wird GDF-10 häufig hinsichtlich seiner Effekte auf Linienfestlegung, Migration und kontextabhängige Wachstumsregulation in humanen Zellmodellen untersucht.

Das GDF-10 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des GDF10-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des GDF10-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von GDF10 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die GDF-10-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von GDF10-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der GDF-10-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf GDF10-Exone abzielen, die für die GDF-10-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere GDF10-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom GDF-10 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom GDF-10 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des GDF10-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das GDF-10 HDR-Plasmid (h) und GDF-10 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von GDF10-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten GDF10-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.