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GATA4双切口酶质粒(h) | sc-400122-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GATA4双切口酶质粒(h2) | sc-400122-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GATA4 编码一种锌指型转录因子,能够结合 GATA 基序,从而调控控制心脏形态发生、心肌细胞分化以及内胚层来源器官发育的基因程序。GATA4 与 NKX2-5、TBX5 和 FOG 家族蛋白等辅因子协同作用,整合包括 BMP、WNT 和 MAPK 通路在内的信号输入,以协调谱系指定与组织重塑。GATA4 的剂量或序列发生改变会扰乱调控心脏与胃肠道发育的转录网络;此外,GATA4 依赖的增强子活性失调也与先天性心脏缺陷以及与心肌病相关的基因表达改变有关。作为染色质相关转录的枢纽调控因子,GATA4 被广泛用于研究发育过程中的基因调控回路与细胞命运控制。
GATA4 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 GATA4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GATA4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏GATA4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了GATA4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。