G3BP2 Plasmide Double Nickase (h): sc-403630-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- G3BP2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il G3BP2 Double Nickase Plasmid (h) e il G3BP2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira G3BP2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
G3BP2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-403630-NIC | 20 µg | $410.00 |
G3BP2 (G3BP stress granule assembly factor 2) è una proteina legante l’RNA che funge da principale nucleatore dei granuli da stress e da regolatore della stabilità e della traduzione dell’mRNA durante lo stress cellulare. Partecipa al controllo genico post-trascrizionale collegato alle vie di segnalazione MAPK e dell’immunità innata, influenzando il modo in cui le cellule si adattano allo stress ossidativo, all’infezione virale e a condizioni proteotossiche. Attraverso interazioni con l’RNA e con complessi ribonucleoproteici, G3BP2 contribuisce a coordinare il rimodellamento del trascrittoma e del proteoma in risposta allo stress. L’attività deregolata di G3BP2 e la dinamica dei granuli da stress sono state studiate in contesti che includono la biologia del cancro, la neurodegenerazione e le risposte ospite–patogeno, rendendola rilevante per studi meccanicistici sul destino cellulare e sulla segnalazione infiammatoria.
G3BP2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus G3BP2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di G3BP2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di G3BP2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con G3BP2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.