Plásmido Doble Nickase (h) FXYD2: sc-404044-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)FXYD2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa FXYD2 (h) y el plásmido de doble nickasa FXYD2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a FXYD2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) FXYD2 | sc-404044-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) FXYD2 | sc-404044-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FXYD2 codifica una pequeña proteína de membrana de paso único que actúa como subunidad reguladora específica de tejido de la Na⁺/K⁺-ATPasa, modulando la cinética de la bomba y la homeostasis iónica. En el riñón humano y otros epitelios, FXYD2 contribuye al manejo transepitelial del sodio y al equilibrio osmótico celular, vinculándola con procesos más amplios como la regulación del potencial de membrana y el transporte de electrolitos. La alteración de la expresión o la función de FXYD2 se ha asociado con la fisiología tubular renal y con fenotipos de enfermedades tubulointersticiales hereditarias, y se ha explorado en contextos de respuestas al estrés metabólico. Dado que la actividad de la Na⁺/K⁺-ATPasa influye en la señalización aguas abajo y en la bioenergética celular, FXYD2 es un objetivo útil para estudiar vías dependientes del transporte iónico en la biología epitelial.
FXYD2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus FXYD2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de FXYD2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de FXYD2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con FXYD2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.