FTSJD1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-412604-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FTSJD1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase FTSJD1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase FTSJD1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CMTR2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FTSJD1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-412604-NIC | 20 µg | $410.00 |
CMTR2 codifica FTSJD1, uma metiltransferase 2′-O da ribose específica do cap que contribui para a maturação do mRNA ao modificar o primeiro nucleotídeo transcrito, gerando estruturas Cap1. Essa marca epitranscritômica sustenta a estabilidade adequada do RNA, a eficiência de tradução e a discriminação entre RNA próprio e não próprio, conectando-se a vias de detecção da imunidade inata que monitoram alterações no capeamento e no processamento de RNA. Assim, a atividade de CMTR2 está ligada a interações hospedeiro–vírus e a respostas ao estresse celular que dependem de uma vigilância precisa do transcriptoma. A desregulação da metilação do cap e de processos relacionados de controle de qualidade do RNA tem sido associada a alterações na sinalização inflamatória e a mudanças dependentes do contexto em programas de expressão gênica relevantes para a biologia de doenças.
FTSJD1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CMTR2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CMTR2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CMTR2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CMTR2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.