FTSJ1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-411789

Visão geral

FTSJ1 codifica uma metiltransferase de RNA 2′-O dependente de S-adenosil-L-metionina, conservada, que modifica tRNAs específicos para sustentar a decodificação precisa e uma tradução eficiente. Ao moldar os perfis de modificações de tRNA, a FTSJ1 influencia a proteostase, as respostas ao estresse e o controle global da síntese proteica, em interseção com a função do ribossomo e com vias de controle de qualidade da tradução. A interrupção da atividade de FTSJ1 tem sido associada a fenótipos do neurodesenvolvimento, e variantes patogênicas estão ligadas à deficiência intelectual ligada ao X, destacando sua importância em programas de expressão gênica neuronal. Estados alterados de modificação de tRNA relacionados à FTSJ1 também podem afetar o crescimento e a diferenciação celular por meio de efeitos downstream na fidelidade translacional.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO FTSJ1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene FTSJ1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do FTSJ1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do FTSJ1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína FTSJ1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de FTSJ1 para a investigação da sinalização de FTSJ1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) FTSJ1 críticos para a função FTSJ1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos FTSJ1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo FTSJ1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo FTSJ1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus FTSJ1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo FTSJ1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR FTSJ1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia FTSJ1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo FTSJ1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.