Plásmido Doble Nickase (h) FSHR: sc-400899-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)FSHR consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa FSHR (h) y el plásmido de doble nickasa FSHR (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a FSHR. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) FSHR | sc-400899-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) FSHR | sc-400899-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El receptor de la hormona foliculoestimulante (FSHR) es un receptor acoplado a proteína G que se expresa predominantemente en células somáticas gonadales, donde la unión de la hormona foliculoestimulante activa la señalización de Gαs/adenilato ciclasa para aumentar el AMPc y poner en marcha programas de transcripción dependientes de PKA. Entre los efectos posteriores se incluyen la modulación de la esteroidogénesis, la proliferación, la diferenciación y la supervivencia celulares mediante una señalización coordinada con las vías MAPK/ERK y PI3K/AKT. En biología humana, la función de FSHR es fundamental para la regulación de la foliculogénesis y la espermatogénesis, vinculando la actividad del receptor con la endocrinología reproductiva y con estados celulares sensibles a hormonas. La alteración de la expresión o de la señalización de FSHR se ha estudiado en el contexto de fenotipos de infertilidad, disfunción ovárica y desregulación de vías endocrinas relevantes para la investigación del sistema reproductor.
FSHR El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus FSHR en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de FSHR. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de FSHR. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con FSHR alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.